sábado, 19 de noviembre de 2016

Prueba de PCR para la Diabetes Mellitus tipo 2

TEMA: La inflamación vascular crónica en pacientes con diabetes tipo 2

OBJETIVOS: La inflamación vascular crónica puede jugar un papel en el desarrollo de complicaciones macrovasculares en pacientes diabéticos. En este estudio, examinamos la asociación de la expresión endotelial de dos mediadores inflamatorios, receptor para el producto final de glicación avanzada (RAGE) y la proteina quimiotáctica de monocitos-1 (MCP-1), con diabetes tipo 2 usando una nueva biopsia endotelial y técnicas de RT-PCR.

TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA: Muestras endoteliales obtenidas de la aorta (biopsia).

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO A SER EXTRAÍDO: ADNc obtenido a partir de la retrotranscripción del ARN.

GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: Los ADNc se amplificaron con 25 ciclos de amplificación de PCR usando un cebador que contiene oligo dT24 y sitios policlonados (5'-ATATGGATCCAAGCTTCGAATTCGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-3 ').

TIPO DE PCR: RT - PCR

VISUALIZACIÓN: No es necesaria la visualización con Electroforesis.

Expresión de marcadores de células, RAGE y MCP-1 en las células endoteliales derivadas del paciente. El paciente en A tiene diabetes tipo 2; el paciente en B no.

Bibliografía:
  • Lei Feng, Carolyn Matsumoto, Allan Schwartz, Ann Marie Schmidt,
    David M. Stern y John Pile-Spellman. Chronic Vascular Inflammation in Patients With Type 2 Diabetes. Diabetes Care 2005 Feb; 28(2): 379-384. Disponible en: http://care.diabetesjournals.org/content/28/2/379.full

jueves, 17 de noviembre de 2016

Pruebas de Tamizaje y Confirmatorias para el diagnóstico de la Diabetes Mellitus tipo 2

La organización mundial de la salud (OMS), define tamizaje como “el uso de una prueba sencilla en una población saludable, para identificar a aquellos individuos que tienen alguna patología, pero que todavía no presentan síntomas”, en este sentido, existen varias pruebas para determinar si una persona padece de Diabetes Mellitus tipo 2.

Pruebas de Tamizaje:

  • Prueba de Tolerancia Oral a la Glucosa (PTOG): consiste en la medición de la glucemia dos horas después de dar una carga oral de 75 gramos de glucosa.
  • Glucemia en ayunas: es la prueba más sencilla para el tamizaje oportunístico de DM en personas asintomáticas.
  • Determinación de glucosa plasmática y urinaria: si la concentración de glucosa es superior a 200 mg./dl en el plasma.
  • Prueba por glucómetro con sangre capilar, tipo sensor.
  • Determinación de insulina o péptido C: en la diabetes mellitus tipo 2 tiende a ser elevada para vencer la resistencia de los tejidos a su acción.
Es muy importante tener en cuenta que una prueba de tamizaje solo indica una alta probabilidad de tener DM y debe ser confirmada con una prueba diagnóstica.

Pruebas Confirmatorias:
  • Diagnostico de hemoglobina glicosilada (Hba1c): mide el nivel promedio de glucosa en la sangre durante los últimos tres meses. 
  • Determinación de anticuerpo por método de ELISA.
Bibliografía:

viernes, 11 de noviembre de 2016

Alteraciones de la Epigenómica en la Diabetes Mellitus

La Diabetes Mellitus tipo 2 es el resultado de la interacción entre el acervo genético y la nutrición. Como sabemos, la obesidad es un factor de riesgo para desarrollar dicha enfermedad, sin embargo, no todos los seres humanos obesos la tienen.

En los islotes pancreáticos de pacientes diabéticos se describieron un número importante de genes metilados, sugiriendo que diversos mecanismos epigenómicos pueden estar implicados en la disfunción de las células β y en la patogénesis de la diabetes, abriendo la puerta al estudio del papel de la nutrición en dichos mecanismos.

En relación con la resistencia a la insulina, un estudio en 84 parejas de gemelos monocigóticos describió una asociación entre la metilación global del ADN y el índice HOMA28. Un gen que puede jugar un papel destacado es el PPARGC1A, donde la metilación de su promotor aumentó un 50% en los islotes pancreáticos de pacientes diabéticos en comparación con los no diabéticos.

Diversos factores ambientales, entre los que destaca la hiperglucemia, contribuyen a la progresión de las complicaciones diabéticas ya que se ha revelado una estrecha relación con ciertas modificaciones en la cromatina.
Algunos genes que sufren cambios en la metilación de sus CpGs, así como las vías metabólicas relacionadas con la obesidad en las que participan.
Bibliografía:

sábado, 29 de octubre de 2016

Alteraciones en la Traducción de la Diabetes Mellitus

Como sabemos, la genética consiste en cómo el ADN de los genes se transcribe a ARN mensajero (ARNm) para posteriormente traducirse en proteínas. Sin embargo, existe una excepción: 

Según una investigación realizada en los últimos años, habría otro tipo de ARN: el ARNInc (ARN largo no codificante), éste no se traduce en proteína y se puede encontrar en diferentes partes del cuerpo uno de ellos es el páncreas y se cree que podría tener cierta importancia en la predisponibilidad de las células beta pancreáticas a reducir su funcionamiento.

Por otro lado, el ARNInc regula la expresión de un gen íntimamente relacionado con la diabetes llamado GLIS3; ello indica que al menos alguno de estos genes ARNInc desempeñan funciones reguladoras. Finalmente, el ADN que codifica algunos de los ARNInc se encuentra en zonas del genoma identificadas como zonas que contienen variaciones de la secuencia de ADN que confieren susceptibilidad a desarrollar Diabetes.

Resultado de imagen para TRADUCCION DIABETES
Bibliografía:

Alteraciones en la Transcripción de la Diabetes Mellitus

La Diabetes Mellitus se relaciona con problemas a nivel de factores de transcripción:

La diabetes MODY se presenta debido a alteraciones en los factores de transcripción hepatonucleares que cumplen una función importante en el desarrollo y proliferación de las células beta del páncreas causando una disfunción de las mismas.

Por otro lado, en la Diabetes tipo 2, se ha determinado el papel clave de dos factores de transcripción, estos son TCF7L2 y el HHEX, en ausencia de éstos se deteriora la actividad pancreática. 

Se ha demostrado también que cambios en la transcripción a nivel de el gen SLC30A8 sería una de las causas de la enfermedad, debido a que este gen produce la proteína ZnT8 encargada del transporte del zinc que permite a la insulina fijarse al páncreas; por lo que se deteriora la capacidad de producción de la insulina, aumentando el riesgo de padecer la enfermedad. 

Además se puede observar mutaciones en genes que codifican las proteínas como la glucocinasa, por ende existe la baja producción de insulina. Entre los factores de transcripción que regulan la transcripción del gen de la insulina a ARNm tenemos: factor promotor de insulina 1 (IPF-1) y los génesis HFN-1, 4 alfa y 1 beta que se expresan en el hígado y en los islotes de Langerhans.

Bibliografía:

lunes, 17 de octubre de 2016

Alteraciones de la Replicación o de la Genómica en la Diabetes Mellitus

El desarrollo de la Diabetes Mellitus tipo II se debe a varios factores, entre ellos el genético, por lo que se han asociado 3 tipos de genes con dicha enfermedad: PPARG, KCNJ11 y TCF7L2. 
  • Pro12Ala del gen PPARG: regula la adipogénesis; los individuos homocigotos para el alelo de la prolina son más insulinorresistentes y tienen un 20% más de riesgo de desarrollar DM2. 
  • KCNJ11: codifica los canales de potasio de las células beta
  • Transcription factor 7-like 2 (TCF7L2): codifica proteínas implicadas en la secreción de insulina, es el gen más fuertemente asociado con la DM2 con cuatro polimorfismos en dicho gen.
Por otro lado, mutaciones en el gen de la glucocinasa y de los factores transcripcionales HNF-1a, HNF-4a, IPF-1, HNF-1b y HNF-3b han sido demostradas como causa de la diabetes tipo MODY que resultan en un defecto en la síntesis o la secreción de insulina.

Finalmente, también se ha señalado que las mutaciones en el gen Kir6.2, implicado en la función de las células beta pancreáticas, pueden explicar un 12% del riesgo atribuible al desarrollo de Diabetes Mellitus tipo II.

Replicación Normal
Bibliografía:

sábado, 8 de octubre de 2016

Diabetes Mellitus tipo 2


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La diabetes mellitus clínica es un grupo de enfermedades metabólicas caracterizadas por hiperglucemia resultante de defectos en la secreción de insulina, acción de la insulina (resistencia a la misma), o ambos. La hiperglucemia crónica de la diabetes se asocia con daño a largo plazo, disfunción e insuficiencia de los diferentes órganos, especialmente los ojos, riñones, nervios, corazón y vasos sanguíneos.

En la diabetes tipo 2, el cuerpo produce insulina pero o no es la suficiente o el cuerpo no puede utilizarla adecuadamente. Existen 2 razones por las que no se puede utilizar la insulina:
  • Las células beta producen insulina pero no la suficiente para reducir los niveles de azúcar en la sangre y cubrir los requerimientos de energía del cuerpo.
  • En la resistencia a la insulina, los mecanísmos de las células para utilizar la insulina no son los adecuados y, por lo tanto, no pueden introducir el azúcar a la célula.

Bibliografía: